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生物素過(guò)量帶來(lái)的問(wèn)題及谷氨酸發(fā)酵消泡劑

分類(lèi):行業(yè)新聞 發(fā)布時(shí)間:2012-08-14 瀏覽量:6

選用油酸缺陷型在大量的研究工作中,發(fā)現(xiàn)了這樣的現(xiàn)象,即培養(yǎng)基中缺乏生物素時(shí),只要加入油酸,就能起到和生物素相同的效果。如上所述,生物素與谷氨酸發(fā)酵消泡劑的作用在于影響細(xì)胞膜中的脂肪酸,而油酸的加入直接增加了合成磷脂所需的不飽和脂肪酸,所以,選育油酸缺陷型就成為重要的替代手段。當(dāng)選用油酸缺陷型時(shí),只要控制油酸的亞適量,就能控制細(xì)胞膜的透性,而與生物素的含量無(wú)關(guān)。選用甘油缺陷型實(shí)驗(yàn)證明,限量甘油(0.02%)培養(yǎng),細(xì)胞膜的磷脂含量只有非甘油缺陷型菌株的50%。只有甘油的加入量起作用,而與生物素及油酸的含量無(wú)關(guān)。 這些現(xiàn)象都可以解釋一個(gè)問(wèn)題,那就是因?yàn)榱字怯芍舅?、甘油、磷酸和R(膽堿、乙醇酸、絲氨酸、肌醇)4部分組成,缺少其中的一個(gè)都不可能合成,控制其中之一,都可以控制磷脂的含量。溫度敏感性變異株當(dāng)細(xì)菌進(jìn)行誘變處理后,可以獲得溫度敏感性變異株。例如,在30℃時(shí)生長(zhǎng)旺盛,而在較高溫度(如37℃)則不生長(zhǎng),或稍生長(zhǎng),而能大量生成谷氨酸。于是可用這樣的變異株在富含生物素的培養(yǎng)基中,前期進(jìn)行30℃培養(yǎng),當(dāng)菌的生長(zhǎng)達(dá)到最大時(shí),提高溫度至40℃,使其大量積累谷氨酸。添加飽和脂肪酸酯類(lèi)等的效果在生物素豐富的條件下,添加聚氧乙烯乙二醇的棕櫚酸(C18)、十七烷酸(C17)、硬脂酸(C16)等的飽和脂肪酸酯類(lèi)或飽和脂肪酸,都能使大量谷氨酸排出于菌體外。表面活性劑、高級(jí)飽和酸的作用,不在于它的表面效果,而是在不飽和脂肪酸的合成過(guò)程中,作為抗代謝物具有抑制作用,對(duì)生物素或油酸有拮抗作用,阻遏脂肪酸生物合成,于是磷脂形成減少,膜透性加大,有利于谷氨酸向外滲漏。添加青霉素的效果在生物素豐富時(shí),培養(yǎng)中途如果添加青霉索、谷氨酸發(fā)酵消泡劑,可以使谷氨酸生成。青霉素的作用機(jī)制與控制生物索、控制油酸或添加表面活性劑及控制甘油的機(jī)制均不同。添加青霉素與谷氨酸發(fā)酵消泡劑是抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的后期合成,對(duì)細(xì)胞壁糖肽生物合成系統(tǒng)起作用。這是因?yàn)榍嗝顾厝〈铣商请牡牡孜锒兔傅幕钚灾行慕Y(jié)合,使網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)連接不起來(lái),結(jié)果形成不完全的細(xì)胞壁。沒(méi)有細(xì)胞壁保護(hù)的細(xì)胞膜由于膜內(nèi)外的滲透壓差,使細(xì)胞膜受到機(jī)械損傷,失去了作為滲透障礙物的作用,從而使谷氨酸排出;另一種解釋是:青霉素雖不能抑制磷脂的合成,但能造成磷脂向胞外分泌。無(wú)論是青霉素,還是表面活性劑,或是飽和脂肪酸,都必須在藥劑添加之后,菌體仍然進(jìn)行分裂增殖,完成谷氨酸非積累型細(xì)胞向谷氨酸積累型細(xì)胞轉(zhuǎn)變。在休止細(xì)胞中添加藥劑,將不起作用。在高濃度油酸的條件下,表面活性劑并沒(méi)有效果,但添加青霉素是有效的。本文參考《發(fā)酵微生物學(xué)》一書(shū)。